使用光學(xué)顯微鏡前,首先要把光學(xué)顯微鏡的目鏡和物鏡安裝上去。目鏡的安裝較為簡單,主要的問題在于物鏡的安裝,由于物鏡鏡頭較貴重,萬一安裝時螺紋沒合好,易摔到地上,造成鏡頭損壞,所以為了保險起見,強(qiáng)調(diào)在安裝物鏡時要用左手食指和中指托住物鏡,然后用右手將物鏡裝上去,這樣即使沒安裝好,也不會摔到地上。
對光是使用光學(xué)顯微鏡時很重要的一步,有些在對光時,隨便轉(zhuǎn)一個物鏡對著通光孔,而不是按要求一定用低倍鏡對光。轉(zhuǎn)動反光鏡時喜歡用一只手,往往將反光鏡扳了下來。所以一定要用低倍鏡對光,當(dāng)光線較強(qiáng)時用小光圈、平面鏡,而光線較弱時則用大光圈、凹面鏡,反光鏡要用雙手轉(zhuǎn)動,當(dāng)看到均勻光亮的圓形視野為止。光對好后不要再隨便移動醫(yī)用光學(xué)顯微鏡,以免光線不能準(zhǔn)確地通過反光鏡進(jìn)入通光孔。
使用準(zhǔn)焦螺旋調(diào)節(jié)焦距,找到物象可以說是光學(xué)顯微鏡使用中重要的一步。在操作過程中極易出現(xiàn)以下錯誤:一是在高倍鏡下直接調(diào)焦;二是不管鏡筒上升或下降,眼睛始終在往目鏡中看視野;三是不了解物距的臨界值,物距調(diào)到2~3厘米時還在往上調(diào),而且轉(zhuǎn)動準(zhǔn)焦螺旋的速度很快。前兩種錯誤結(jié)果往往造成物鏡鏡頭抵觸到裝片,損傷裝片或鏡頭,而第三種錯誤則是醫(yī)用光學(xué)顯微鏡時常見的一種現(xiàn)象。針對以上錯誤,調(diào)節(jié)焦距一定要在低倍鏡下調(diào),先轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋,使鏡筒慢慢下降,物鏡靠近載玻片,但注意不要讓物鏡碰到載玻片,在這個過程中眼睛要從側(cè)面看物鏡,然后用左眼朝目鏡內(nèi)注視,并慢慢反向調(diào)節(jié)粗準(zhǔn)焦螺旋,使鏡筒徐徐上升,直當(dāng)看到物像為止,光學(xué)顯微鏡的物距在1厘米左右,所以如果物距已遠(yuǎn)超過1厘米,但仍未看到物像,那可能是標(biāo)本未在視野內(nèi)或轉(zhuǎn)動粗準(zhǔn)焦螺旋速度過快,此時應(yīng)調(diào)整裝片位置,然后再重復(fù)上述步驟,當(dāng)視野中出現(xiàn)模糊的物像時,就要換用細(xì)準(zhǔn)焦螺旋調(diào)節(jié),只有這樣,才能縮小尋找范圍,提高找到物像的速度。
使用低倍鏡后換用高倍鏡,用手指直接推轉(zhuǎn)物鏡,容易使物鏡的光軸發(fā)生偏斜,原因是轉(zhuǎn)換器的材料質(zhì)地較軟,精度較高,螺紋受力不均勻很容易松脫。一旦螺紋破壞,整個轉(zhuǎn)換器就會報廢。應(yīng)手握轉(zhuǎn)換器的下層轉(zhuǎn)動板轉(zhuǎn)換物鏡。
用光學(xué)顯微鏡觀察物體時,應(yīng)雙眼同時睜開,左眼往目鏡內(nèi)注視。用手捂住右眼或干脆閉上右眼,這是不符合實(shí)驗(yàn)的觀察要求的,這種不良習(xí)慣會造成左眼疲勞,同時也不能做到邊觀察邊畫圖。左眼要盡量貼近目鏡,右眼試圖向視野內(nèi)注視,如此反復(fù)訓(xùn)練,就會達(dá)到雙目同時睜開觀察的要求?;蛘咭部梢酝ㄟ^做以下練習(xí):睜開雙眼,用一張紙或手掌豎立在兩眼之間,鼻子跟前,使左右眼不能互看對側(cè)一邊,然后有意識地先看左邊,再看右邊,如此3~5次,每天早晚各做一遍,不到一星期便可學(xué)會。
光學(xué)顯微鏡的使用或操作錯誤,是生物實(shí)驗(yàn)中普遍存在的現(xiàn)象,我們只要認(rèn)真地對待,有意識地去糾正它,克服它,熟練而正確地使用光學(xué)顯微鏡是可以做的。