冰凍切片是將新鮮樣品立即在液態(tài)氮或其他制冷劑中直接冰凍或者經(jīng)化學(xué)固定后的樣品再冰凍,置于低溫下迅速凍結(jié)達(dá)到一定的硬度后直接進(jìn)行切片的一種方法。目前,冰凍切片主要用于臨床病理快速診斷和部分形態(tài)學(xué)研究性工作中。
了解冰凍切片的原理可以更好地運(yùn)用在臨床病理取材中,也便于在臨床教學(xué)中更好地學(xué)習(xí)與實(shí)踐。本文就冰凍切片的原理和其優(yōu)缺點(diǎn)進(jìn)行簡(jiǎn)單的闡述。
冰凍切片的原理
組織經(jīng)過冷凍后,其內(nèi)的水分結(jié)冰,起到了包埋劑的作用,使組織變硬,有利于切成薄片。其過程比較簡(jiǎn)單,無需經(jīng)過脫水和透明步驟,組織經(jīng)固定或不固定都可切片,一般亦可切成幾微米的薄片。由于組織不經(jīng)溶劑處理,不受試劑的強(qiáng)烈刺激及溫度的影響,所以組織沒有顯著的收縮,細(xì)胞形態(tài)沒有大的改變,脂肪和類脂也能較好保存。這樣,冰凍切片除了對(duì)外科手術(shù)中的快速診斷十分有意義外,在組織化學(xué)、免疫組織化學(xué)、免疫定位、原位雜交、酶定位及植物微管研究中也被廣泛地應(yīng)用。
和其他幾種切片方法相比,冰凍切片有著*性,但也有一定的局限性。
優(yōu)點(diǎn)
1)簡(jiǎn)便,快速,用時(shí)短。在臨床上,手術(shù)的摘出物需急速診斷時(shí),用此法從采取標(biāo)本到切片制成,可以在15min之內(nèi)完成。切片前可以不需要對(duì)組織固定、脫水、透明、包埋等手續(xù)即可進(jìn)行切片,減少了一些中間環(huán)節(jié)。
2)組織變化不大。能較好地保存脂肪、類脂等成分;在免疫組織化學(xué)研究中有利于組織抗原性的保存;有些研究為了保存某些酶的活性也需要采用此法。特別是對(duì)于那些對(duì)有機(jī)溶劑或熱的溫度耐受能力較差的細(xì)胞膜表面抗原和水解酶保存較好。